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Electroforesis

La electroforesis consiste en una técnica que permite la separación de biomoléculas según su movilidad y naturaleza en un campo eléctrico sobre una matriz porosa, es una de las técnicas de biología molecular más utilizadas ampliamente en el laboratorio. Ya que a través de la electroforesis podemos separar fragmentos de ADN y ARN en función de su tamaño, visualizarlos mediante una sencilla tinción, y de esta forma determinar el contenido de ácidos nucleicos de una muestra, pudiendo tener una estimación de su concentración.

En la actualidad la técnica de electroforesis con sus diferentes modificaciones y complementos, es empleada diariamente para separar moléculas de proteínas y ácidos nucleicos y se complementa con una amplia variedad de instrumentos modernos que han aumentado su precisión en la separación de estas biomoléculas, facilitando su manejo.

Tipos de Electroforesis que puede necesitar tu Laboratorio

Verticales

Esta técnica utiliza un tampón discontinuo. Un cátodo está ubicado en la cámara superior, y el ánodo está ubicado en la cámara inferior. Los electrodos presentes en cada compartimento proporcionan el campo eléctrico requerido. Una capa delgada de gel se vierte entre las dos placas de vidrio montadas. Por lo tanto, la parte superior del gel se sumerge en la cámara superior, y la parte inferior del gel se sumerge en la cámara de la parte inferior.

En la electroforesis en gel vertical, el tampón solo fluye a través del gel. Puede utilizarse gel de acrilamida ya que los compartimentos no están expuestos al oxígeno atmosférico. Debido al tamaño de poro más pequeño del gel de acrilamida, se puede lograr una separación precisa con una resolución más alta.

Horizontales

El gel usado en electroforesis del gel se hace generalmente de agarosa o poliacilamida. Este gel poroso se puede emplear para separar las macromoléculas de diversos tamaños. El gel se sumerge en una solución tampón en una cámara de la electroforesis.

La movilidad electroforética es la velocidad a la cual cada molécula viaja a través del gel y es determinada principal por su carga neta y talla. Las moléculas fuertemente cargadas mueven más rápidamente que débil cargados. Moléculas más pequeñas también se mueven más rápido. Una vez que se completa la separación, se colorea el gel con un tinte para revelar las bandas de la separación. El bromuro de etidio es un tinte fluorescente de uso general en electroforesis del gel. El gel se empapa en una solución diluida del bromuro de etidio y después se coloca en un transilluminator ULTRAVIOLETA para visualizar las bandas de la separación. Las bandas se examinan y se fotografían inmediatamente.

ELECTROFORESIS KALSTEIN

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Guías para que te conviertas en un experto en Electroforesis

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De forma genérica, los síndromes clínicos que resultan de las alteraciones de la hemoglobina (Hb) se conocen como hemoglobinopatías y para conocerlos se interpretan diversas pruebas de laboratorio, de las cuales la más relevante es la electroforesis (EF) de Hb.

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