Il existe deux instruments généraux pour mesurer la fluorescence, qui sont les fluoromètres et les spectrofluorimètres. Dans cet article, nous nous concentrerons sur les différences entre les deux équipements.
La fluorescence peut être définie comme un type de luminescence qui se produit dans des substances gazeuses, liquides ou solides capables d’absorber un rayonnement électromagnétique (par exemple, la lumière) et d’émettre une partie de cette énergie sous forme de rayonnement d’une longueur d’onde autre que celle absorbée.
Qu’est-ce qu’un fluorimètre ?
Un fluoromètre est un instrument qui utilise des filtres optiques pour isoler la lumière incidente et la lumière fluorescente, et mesure la capacité de l’échantillon à absorber la lumière à une longueur d’onde et à émettre de la lumière à une longueur d’onde plus longue.
Dans ces dispositifs, une source de rayonnement (lumineux) émet une lumière d’une longueur d’onde d’excitation pour le composé à mesurer ou à analyser. L’excitation du composé à analyser est produite grâce à l’utilisation de filtres optiques, ceux-ci fonctionnent en bloquant d’autres longueurs d’onde et en transmettant la longueur d’onde appropriée pour produire une excitation du composé. La lumière générée par la source de rayonnement traverse l’échantillon à mesurer, et une certaine quantité de longueur d’onde est absorbée, alors qu’elle est ensuite émise à une longueur d’onde plus longue. Cette lumière émise est mesurée par un détecteur.
Les fluorimètres sont très sensibles et les filtres optiques qu’ils utilisent sont généralement peu coûteux et faciles à changer. Cela fait des fluorimètres des équipements largement utilisés dans la recherche scientifique et expérimentale et à des fins académiques.
Qu’est-ce qu’un spectrofluorimètre ?
Les spectrofluorimètres sont des équipements utilisés pour analyser la fluorescence d’un échantillon. Ils utilisent des monochromateurs à réseau de diffraction pour isoler la lumière incidente et la lumière fluorescente. Ils utilisent généralement des monochromateurs d’excitation, qui comprennent un diffuseur de longueur d’onde, et un monochromateur d’émission.
Ces équipements comportent quatre composants principaux : une source de rayonnement (lampe Xénon ou un laser), un monochromateur d’excitation (chargé de sélectionner la longueur d’onde appropriée pour l’excitation de l’échantillon), un monochromateur d’émission (qui analyse les émissions produites par la fluorescence émise par l’échantillon) et un photodétecteur qui reçoit les ondes lumineuses et les transforme en une unité mesurable proportionnelle à l’intensité de la lumière reçue.
Parmi les avantages d’un spectrofluorimètre, il permet de sélectionner une longueur d’onde variable, mais il est beaucoup plus cher que les fluorimètres et ne peut offrir qu’une sensibilité et une spécificité modérées.
Les spectrofluorimètres sont utilisés dans l’étude de la cinétique de réaction, l’étude de la photochimie des systèmes biologiques, la qualité de l’eau, le contrôle de la qualité du vin, l’étude de la luminescence et de la photoluminescence.
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