La réfraction est le changement de la vitesse d’une onde qui se produit sur une surface lorsqu’elle passe d’un milieu à un autre avec un indice de réfraction différent. L’indice de réfraction est le rapport entre la vitesse de la lumière dans le vide et la vitesse de la lumière dans une autre substance, ce qui fait de l’indice de réfraction une propriété physique spécifique. Ce paramètre d’analyse est une bonne approximation pour les milieux où les pertes par absorption ou d’autres phénomènes sont négligeables.
La formule derrière le phénomène est décrite par la loi Snell, qui est utilisée pour décrire la relation entre les angles d’incidence et la lumière. L’instrument de mesure associé à ce paramètre est appelé réfractomètre, capable de mesurer avec une grande précision jusqu’à 5 chiffres significatifs et est un équipement très utilisé pour caractériser des solutions.
La médecine vétérinaire et l’utilisation du réfractomètre
Depuis les années 1960, la réfractométrie est utilisée comme une technique rapide pour déterminer les protéines totales dans le sérum ou le plasma. Dans le domaine de la médecine vétérinaire, il est utilisé pour déterminer la concentration des solides totaux du plasma et la densité urinaire. De nombreux auteurs ont rapporté que les résultats de l’estimation sont bien corrélés avec ceux obtenus par les méthodes de Biuret et l’uranométrie traditionnelle, respectivement. Les avantages de cette technique par rapport à celles utilisées dans les laboratoires cliniques sont le peu d’échantillon requis pour l’analyse, la rapidité et la simplicité de la mesure et le faible coût associé à l’instrument utilisé (réfractomètre portatif); étant considéré comme un test de terrain acceptable pour sa sensibilité.
Comment le réfractomètre est-il utilisé en médecine vétérinaire?
Comme déjà mentionné, la réfractométrie est utilisée pour déterminer les solides totaux dans le plasma et la densité urinaire. Dans le cas des analyses sanguines, l’angle de réfraction produit par un échantillon de sérum est dû à la participation combinée de tous ses solutés (les solides totaux), où les protéines sont le soluté prédominant. En plus de celle-ci, le plasma sanguin se compose de substances non protéiques (électrolytes, glucose, urée et lipides) qui contribuent à l’angle de réfraction. On peut donc dire que la réfractométrie est une technique de mesure des solides totaux à base de protéines. Certains instruments sont calibrés en concentration de protéines en g/dL, sinon il existe des tableaux qui supposent les solutés non protéiques pour la conversion.
Dans le cas de la densité urinaire, la méthode de référence est basée sur la comparaison du poids d’un volume d’urine avant et après séchage (détermination par picnométrie). Les réfractomètres cliniques ont généralement une échelle équivalente à la densité urinaire basée sur des données provenant d’urines humaines normales, indiquée par le sigle UG (urine gravity), USG (urine specific gravity) ou PE urinaire (Poids spécifique).
Échelles de mesure dans les réfractomètres cliniques vétérinaires
Il existe différentes échelles spécifiques selon l’application. L’échelle la plus utilisée est Grados Brix (proportion de saccharose ou de sels dans une solution). D’autre part, les réfractomètres cliniques vétérinaires comportent généralement deux ou trois échelles:
- L’échelle de la protéine sérique (SP): utilisée pour mesurer les niveaux de protéines totales dans l’échantillon de sérum ou de plasma sanguin. Ses unités sont g/dl (g/100ml).
- L’échelle de l’indice de réfraction (nD ou ND): est généralement référencée par des tableaux de conversion appropriés pour mesurer la concentration de la variété de substances.
- L’échelle de gravité spécifique (SG) ou la gravité urinaire (UG): est généralement utilisée pour mesurer la gravité spécifique dans les échantillons d’urine.
Il convient de noter que l’instrument doit être étalonné en fonction de l’échelle sur laquelle il est en cours de travail. Il est recommandé que le prisme et le couvercle soient bien nettoyés et étalonnés avec de l’eau distillée chaque fois que vous effectuez une mesure.
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