Un lecteur de microplaques ELISA est un spectrophotomètre conçu pour lire les résultats obtenus par ELISA, cette technique est utilisée en laboratoire pour déterminer la présence d’anticorps ou d’antigènes spécifiques dans les échantillons. La technique est basée sur la détection d’un antigène ou d’anticorps capturés sur une surface solide à l’aide directe ou secondaire, des anticorps marqués, qui produisent une réaction dont le produit peut être lu par le spectrophotomètre.
Le lecteur de microplaques d’ELISA est utilisé pour lire les résultats de la technique d’ELISA, car il a la propriété de détecter la lumière émise par des échantillons pipettés sur une microplaque, déterminant ainsi la présence d’anticorps ou d’antigènes spécifiques présents dans un échantillon. Ces lecteurs sont capables d’analyser 96 puits ou plus de microplaques avec des échantillons, ce qui est très utile dans les laboratoires, car ils permettent de réduire la consommation de réactifs et d’échantillons, offrant une grande performance.
Comment fonctionne un lecteur de microplaques ELISA ?
Le lecteur de microplaques ELISA est considéré comme un spectrophotomètre spécialisé. À la différence du spectrophotomètre classique qui fournit des lectures sur une large gamme de longueurs d’onde, la microplaque du lecteur comporte des filtres ou des grilles de diffraction qui limitent la plage de longueurs d’onde par rapport à celle utilisée dans ELISA, généralement entre 400 nm et 750 nm (nanomètres). Bien que certains lecteurs ELISA sont capables d’opérer dans la gamme UV et effectuer des analyses entre 340 et 700 nm.
Ce lecteur de microplaques possède un système optique qui utilise généralement des fibres optiques pour fournir la lumière aux puits de microplaques contenant les échantillons. Le faisceau lumineux qui traverse l’échantillon a un diamètre compris entre 1 et 3 mm. Un système de détection détecte ensuite la lumière provenant de l’échantillon, amplifie le signal et détermine l’absorbance. Un système de lecture le convertit en données permettant l’interprétation des résultats du test. Certains lecteurs de microplaques utilisent des systèmes à double lumière.
Comment fonctionnent les microplaques ?
Les échantillons pendant l’essai ELISA sont placés sur des plaques spécialement conçues (microplaques) avec un nombre spécifique de puits dans lesquels la procédure ou l’essai a été effectué. On utilise généralement des plaques à 8 colonnes par 12 rangées avec un total de 96 puits communs.
Il existe également des plaques avec un plus grand nombre de puits pour des applications plus spécialisées, car il est conseillé pour ces techniques et applications d’augmenter le nombre de puits (plaques de 384 puits), de réduire la quantité de réactifs et d’échantillons utilisés et d’augmenter les performances. L’emplacement des capteurs optiques du lecteur de microplaques peut varier selon la maison du fabricant : peut être placé au-dessus de la plaque d’échantillon ou directement sous les puits de la plaque.
Quand un lecteur de microplaques ELISA est-il utilisé ?
Le lecteur de microplaques est utilisé lors de la lecture des résultats des tests ELISA. Cette technique a une application directe en immunologie et sérologie. Entre autres applications, il confirme la présence d’anticorps ou d’antigènes d’un agent infectieux dans un organisme, d’anticorps d’un vaccin ou d’autoanticorps, par exemple dans la polyarthrite rhumatoïde.
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