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Quelles sont les techniques microscopiques pour déterminer le virus de l’influenza A ?

L’influenzavirus A est un virus de la famille des Orthomyxoviridae. C’est le virus qui provoque la maladie de la grippe A, c’est généralement une grippe plus forte et plus virulente que les autres variantes antigéniques mineures. Le virus de l’influenza A cause généralement la maladie uniquement chez les oiseaux, mais il peut infecter plusieurs espèces de mammifères, dont l’homme. Les sous-types connus de ce virus sont endémiques chez les oiseaux, ce qui en fait une maladie des oiseaux, mais en raison des infections qui se sont produites chez l’homme ces dernières années, surtout dans les pays d’Asie, c’est un virus qui est étroitement surveillé.

Plusieurs tests sont disponibles pour détecter le virus de la grippe A dans les échantillons respiratoires, ceux couramment utilisés sont les tests rapides qui sont chargés de détecter les antigènes, qui sont ceux qui stimulent la réponse immunitaire. Bien sûr, certains de ces tests nécessitent l’utilisation de microscopie électronique ou microscopie d’immunofluorescence pour la visualisation du virus.

Microscope d’immunofluorescence pour la détection des virus grippaux A

Les tests d’immunofluorescence sont un type de test dans lequel la détection d’antigènes est recherchée à l’aide de microscopes fluorescents pour obtenir des résultats, ces tests donnent généralement des résultats dans une période de 2 à 4 heures et ont une bonne sensibilité et spécificité. Les tests utilisés avec les microscopes de fluorescence sont la coloration fluorescente des anticorps directs (DFA) et la coloration fluorescente des anticorps indirects (IFA), tous deux utilisés dans la détection des antigènes grippaux A. Les deux techniques sont expliquées ci-dessous:

  • DFA: est basé sur le traitement de cellules épithéliales respiratoires avec des anticorps spécifiques conjugués avec des colorants fluorescents, puis appliquer un anticorps monoclonal. L’échantillon doit ensuite être affiché au microscope à fluorescence. C’est un test de diagnostic très utile car il génère des résultats rapides et précis.
  • Technique IFA: cette technique permet de détecter les antigènes de micro-organismes ou de virus auxquels des anticorps teints à la fluorescéine ont été fixés. L’échantillon est examiné au microscope à fluorescence.

Les microscopes à fluorescence sont un type de microscope classique caractérisé par l’ajout d’un adaptateur de fluorescence permettant de visualiser des échantillons présentant un contraste de fluorescence. Le microscope à fluorescence utilise une intensité lumineuse plus élevée que la lumière visible utilisée par les microscopes conventionnels, de sorte que la lumière excite les échantillons marqués par fluorescence.

Microscopie électronique pour la détection des virus de l’influenza A

D’autre part, la microscopie électronique est utilisée avec la technique d’isolation virale. Cette technique est très utilisée dans la détection d’infections virales, car elle est très sensible. Pour la détection du virus de la grippe, c’est l’une des meilleures options. La culture virale est basée sur la culture du virus dans des cellules ou des oeufs embryonnés. L’échantillon est ensuite observé sous le microscope électronique, car celui-ci a une augmentation plus importante.

Le microscope électronique est un équipement de laboratoire de grande taille qui utilise un faisceau d’électrons pour l’affichage des images, plutôt que de la lumière visible, car avec cette dernière on ne peut pas observer des agents aussi petits que les virus. Il se compose essentiellement d’une colonne de 1,5 mètre, d’un système à vide élevé et d’un générateur à haute tension, pour produire le faisceau d’électrons qui va impacter l’échantillon. Avec les microscopes électroniques, il est possible d’avoir une augmentation d’environ 1 000 000x, ce qui rend plus facile de voir des virus, des chromosomes, des molécules d’ADN ou des atomes.

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