Un lecteur de microplaques est un spectrophotomètre spécialisé conçu pour lire les résultats d’une technique utilisée pour déterminer la présence d’anticorps ou d’antigènes spécifiques dans un échantillon. La technique est basée sur la détection d’un antigène immobilisé sur une phase solide, au moyen d’anticorps qui, directement ou indirectement, produisent une réaction dont le produit peut être lu par le spectrophotomètre.
Cet équipement est utilisé pour lire les résultats des tests effectués, en utilisant la technique ELISA, qui a une application directe en immunologie et en sérologie ; il permet de confirmer la présence dans l’organisme d’anticorps ou d’antigènes d’un agent infectieux, de vaccins ou d’auto-anticorps.
Quel est votre principe de fonctionnement ?
Contrairement aux spectrophotomètres classiques qui permettent des lectures dans une large gamme de longueurs d’onde, le lecteur de microplaques possède des filtres ou des réseaux de diffraction qui limitent la gamme de longueurs d’onde à celles utilisées dans la technique ELISA, qu’il est généralement réalisée avec des longueurs d’onde comprises entre 400 et 750 nm. Certains analyseurs fonctionnent dans l’ultraviolet et peuvent effectuer des analyses entre 340 et 700 nm. Le système optique utilisé par de nombreux fabricants utilise des fibres optiques pour transporter la lumière vers les puits de la plaque, où se trouve l’échantillon à analyser.
La lumière qui traverse l’échantillon a un diamètre qui varie entre 1 et 3 mm. Un système de détection reçoit l’énergie lumineuse de l’échantillon, l’amplifie, détermine l’absorbance et, grâce à un système de lecture, la convertit en données permettant l’interprétation du résultat du test. Il existe également des lecteurs de microplaques qui utilisent des systèmes d’éclairage à double faisceau. Les échantillons de test ELISA sont placés dans des plaques spécialement conçues, qui ont un nombre défini de puits ou de récipients, dans lesquels la procédure ou le test est effectué.
Les plaques de 8 colonnes sur 12 rangées sont courantes, avec un total de 96 puits. Il existe également des plaques avec un plus grand nombre de puits. Il y a 384 puits et la tendance actuelle est d’augmenter le nombre de puits, et de réduire la quantité de réactifs et le volume d’échantillons requis. L’emplacement des capteurs optiques sur le lecteur de microplaques varie selon les fabricants. Certains les placent sur la plaque d’échantillon, tandis que d’autres les placent directement sous les puits de la plaque.
Quels sont les avantages d’utiliser un lecteur de microplaques ?
Un lecteur de microplaques aide à minimiser le temps de fonctionnement et à réduire les coûts, permettant aux chercheurs de passer plus de temps à analyser les données et à générer des connaissances pratiques.
Vous devez garder à l’esprit qu’il s’agit d’un équipement multimodal, car il permet de réaliser et de mesurer simultanément une variété d’expériences. Les lecteurs de microplaques peuvent effectuer des mesures d’absorbance, de fluorescence et de luminescence. Quel que soit le type d’analyse, les expériences sur le lecteur de plaques utilisent une courbe standard pour déterminer les valeurs expérimentales. Cette courbe utilise des échantillons de concentration connue pour générer une ligne de meilleur ajustement ou une courbe standard. Les valeurs expérimentales sont ensuite extrapolées à la courbe ou calculées à l’aide de l’équation de régression linéaire.
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