Un thermocycleur en temps réel est un équipement de biologie moléculaire largement utilisé dans les laboratoires de cette spécialité. Ces dispositifs effectuent la réaction en chaîne de polymérase en temps réel (qPCR), c’est-à-dire qu’ils permettent d’effectuer la PCR tout en étant capables de quantifier de manière absolue le produit de l’amplification.
La PCR en temps réel est une technique permettant de déterminer des quantités d’ADN ou d’ARN dans une grande variété de tests impliquant l’expression de gènes, la détection d’agents pathogènes et transgéniques, le génotypage, la détermination de la charge virale, entre autres. Cette technique présente des caractéristiques importantes telles qu’une grande spécificité, une large gamme de détection et une visualisation rapide du produit.
Comment fonctionne un thermocycleur en temps réel ?
Un thermocycleur en temps réel a la capacité de faire peser sur chaque échantillon un faisceau de lumière spécifique (à une longueur d’onde donnée) et de détecter la fluorescence émise par un fluorochrome excité. Cet équipement peut chauffer et refroidir rapidement les échantillons, permettant aux étapes de la réaction en chaîne de polymérase d’être effectuées, ce processus se compose d’une série de changements de température qui se répètent 25-40 fois.
C’est-à-dire que cet équipement effectue de manière automatique et cyclique les changements de température requis pour l’amplification d’une chaîne d’acide désoxyribonucléique (ADN); à partir d’une enzyme thermostable et l’utilisation de substances marquées d’un fluorophore permettant de mesurer le taux de production d’un ou de plusieurs produits spécifiques.
C’est pourquoi un thermocycleur permet de détecter et de quantifier simultanément les séquences spécifiques d’acides nucléiques au moyen de molécules fluorescentes présentes dans la réaction, l’augmentation de la fluorescence étant directement proportionnelle à l’augmentation de la quantité de molécules d’ADN amplifiées dans la réaction.
Comment est conçu un thermocycleur en temps réel ?
Les thermocycleurs en temps réel sont conçus pour offrir une température stable, des performances optiques exceptionnelles, une précision et une précision exceptionnelles. Ces dispositifs sont largement utilisés dans divers domaines scientifiques tels que la recherche scientifique, le dépistage et le diagnostic cliniques, les applications médico-légales et les tests d’assurance qualité.
Ces équipements sont équipés d’un puissant système optique couplé, qui surveille les signaux des fluorophores utilisés pour détecter le produit amplifié afin de surveiller la progression de la réaction d’amplification, ainsi que d’un matériel et d’un logiciel pour la capture et l’analyse des données, respectivement. Le système fluorométrique du thermocycleur en temps réel se compose d’une source d’énergie pour exciter les fluorophores (à une certaine longueur d’onde d’excitation) et d’un système de détection permettant de surveiller le signal émis (à une longueur d’onde d’émission).
Dans le processus de réaction, la fluorescence augmente à mesure que le produit est amplifié, les processus d’amplification et de détection sont combinés en une seule étape. Il existe actuellement différents types de thermocycleurs en temps réel, dont les principales différences sont la source d’énergie, qu’ils utilisent pour l’excitation. Il existe généralement trois types de sources : les lampes à lumière, les diodes électroluminescentes (DEL) et les lasers.
Que t’offrons-nous à Kalstein ?
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